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CCK-8试剂盒 WST-8 细胞增殖 细胞毒性

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有效期至: 长期有效
最后更新: 2017-12-25 05:00
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“CCK-8试剂盒 WST-8 细胞增殖 细胞毒性”参数说明

是否有现货: 类型: 氧化还原酶类
型号: CT-K-10 规格: 10毫升
商标: 炎熙生物 包装:
尺寸: 小于10厘米 产量: 10000

“CCK-8试剂盒 WST-8 细胞增殖 细胞毒性”详细介绍

货号 规格

CT-K-1

1毫升

CT-K-5

5毫升

CT-K-10

10毫升

CT-K-30

30毫升

CT-K-50

50毫升

检测原理Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒),是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8属于MTT的升级产品,能在电子载体1-甲氧基PMS的作用下被还原成水溶性甲臜产物,生成的甲臜量与活细胞数量成正比,因此颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值,可以反映活细胞数量。

 CCK-8法与普通的MTT法相比,具有显著特点:
★灵敏度高,数据可靠,重现性好★操作简便,省时省力
★水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞
★无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低
★为1瓶溶液,毋需预制,即开即用
★适合于高通量药物筛选

CCK-8用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验

CCK-8方法的优势
CCK-8法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较
检测方法 MTT XTT WST-1 CCK-8
甲臜产物的水溶性 差(需加有机溶剂溶解后再检测)
产品性状 粉末 2瓶溶液 溶液 1瓶溶液
使用方法 配成溶液后使用 现配现用 即开即用 即开即用
检测灵敏度 很高 很高
检测时间 较长 较短 较短 最短
检测波长 560-600nm 420-480nm 420-480nm 430-490nm
细胞毒性 高,细胞形态完全消失 很低,细胞形态不变 很低,细胞形态不变 很低,细胞形态不变
试剂稳定性 一般 较差 一般 很好
批量样品检测 可以 非常适合 非常适合 非常适合
便捷程度 一般 便捷 便捷 非常便捷
保存条件:4ºC避光保存一年有效, -20ºC避光保存两年有效。 避免反复冻融。

CCK-8试剂盒操作说明
CCK-8溶液可直接加入到细胞中,不需要与其它组分预混。由于CCK-8溶液非常稳定并且细胞毒性很小,所以可以进行长时间孵育,例如孵育24-48小时。在进行以下实验之前,可先设置空白对照孔,仅加入相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液,不加入细胞。
方法一. 制作标准曲线(测定细胞具体数量)
1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞到培养板内。
2、按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每个浓度建议3-6个复孔。
3、接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后按培养基体积的10%加入CCK-8试剂,培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),OD值为纵坐标(Y轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间。)
方法二. 细胞活性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养一段时间(37℃,5% CO2)。
2、向每孔加入10 μL CCK-8溶液。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
方法三. 细胞增殖-毒性检测
1、在96孔板中加入90μL的细胞悬液。将培养板放在培养箱预培养24小时(37℃,5% CO2)。
2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。
3、将培养板在培养箱中孵育适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。
4、向每孔加入10μL CCK-8溶液。
5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。

活力计算:细胞活力(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(不加药)-A(空白)] ×100A(加药):具有细胞、CCK 溶液和药物溶液的孔的吸光度A(空白):具有培养基和CCK 溶液而没有细胞的孔的吸光度A(0 加药):具有细胞、CCK 溶液而没有药物溶液的孔的吸光度细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力


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